激光共聚焦顯微鏡的使用需要注意以下要點：

嚴(yán)格按照使用規(guī)則操作，不要隨意更改操作程序。激光共聚焦顯微鏡中的激光發(fā)射管具有有限的使用壽命并且昂貴，因此，在操作和使用過程中，重要的是在開關(guān)的啟動順序和掃描過程中保護(hù)激光管。

小心不要接觸中等功率和高功率的激光輻射。特別注意不要使用激光束直接照射樣品。此外，不要在共焦顯微鏡附近存放或使用易燃或易爆物質(zhì)、液體或氣體，布或紙等易燃材料也不應(yīng)放在光路中。

在使用前，確保激光掃描共聚焦顯微鏡的軸向位置校準(zhǔn)準(zhǔn)確，以確保圖像的準(zhǔn)確性和清晰度。

根據(jù)觀察的樣本類型和目標(biāo)，調(diào)整激光功率、掃描速度和圖像分辨率。如果觀察的是厚樣本或染色的樣本，需要使用較高的激光功率以穿透樣本。如果觀察的是動態(tài)過程或快速變化的過程，需要使用較快的掃描速度。如果需要高分辨率的圖像，可以使用較小的掃描區(qū)域和較小的掃描步長。

注意過度曝光問題，如果圖像過于明亮或曝光過度，會影響圖像質(zhì)量。因此，需要根據(jù)樣本類型和目標(biāo)，選擇合適的曝光時間和增益。

使用合適的對照樣本，如果需要比較不同處理或條件下的樣本，需要使用合適的對照樣本以消除誤差和偏差。

儀器周圍要遠(yuǎn)離電磁輻射源，環(huán)境無震動，無強(qiáng)烈的空氣擾動，室內(nèi)具有遮光系統(tǒng)，保證熒光樣品不會被外源光漂白，并且環(huán)境清潔，控制工作溫度在5～25℃。

儀器應(yīng)有專門的實驗室安放，做到干凈、干燥、防震，室內(nèi)安裝空調(diào)和除濕機(jī)，溫度恒定在21℃±1℃，避免陽光直射，使用結(jié)束后蓋好防塵罩，工作人員出入儀器房要換鞋、換實驗服。

激光器的開關(guān)機(jī)順序需要特別注意，一般先開啟顯微鏡和激光器，再啟動計算機(jī)和操作軟件。關(guān)閉時，應(yīng)在激光器關(guān)閉后，待其冷卻至少10分鐘后再關(guān)閉計算機(jī)及總開關(guān)。

使用完儀器后，應(yīng)做好清潔工作，包括光學(xué)部件和機(jī)械部件的清潔。

以上是使用激光共聚焦顯微鏡時需要注意的要點，遵循這些要點可以確保儀器的正常使用和延長其使用壽命。